日韩av片免费播放-日韩av片无码一区二区不卡电影-日韩av无码国产精品-日韩av无码久久一区二区-日韩av无码免费播放-日韩av无码社区一区二区三区

您好,歡迎進入研域(上海)化學試劑有限公司網站!
一鍵分享網站到:
  • 技術文章ARTICLE

    您當前的位置:首頁 > 技術文章 > 用噬菌體上清和人血清進行ELISA

    用噬菌體上清和人血清進行ELISA

    發布時間: 2011-10-18  點擊次數: 1378次

    用噬菌體上清和人血清進行ELISA[
    器材和試劑]
    ● 多孔板 (Immuno plate Maxisorp, Nuric)
    ● 包被緩沖液 (50mmol/L NaHC03, pH 9.6,0.05%硫柳汞)
    ● 單克隆抗體(mAb)57D1。該抗體 能識別M13噬菌體次要衣殼蛋白(pⅢ)的N末端。它是用M13噬菌體 顆粒免疫大鼠而獲得的。來自含57D1 雜交瘤細胞的上清用 50% (NH4)2SO4沉淀,然后在PBS中溶 解并透析,zui后抗體在蛋白G—Sepha— rose上免疫純化。
    ● PBST
    ● 封閉液(PBS,5%脫脂牛奶,0.05% Tween—20,0.02%硫柳汞)
    ● 噬菌體上清
    ● 細菌提取物
    ● PEG—濃縮的nRl—11.1噬菌體
    ● 來自無關的大鼠雜交瘤細胞上清
    ● AP標記的羊抗人IgG Fc—特異性抗體 (Sigma),用封閉液按1:5000比例稀釋
    ● 底物緩沖液(10%二乙醇胺,0.5mmol/ LMgCl2,0.05%NaN3,用HCl調節到 pH 9.8)
    ● 顯色液(1mg/ml p—硝基苯磷酸的底物 緩沖液)
    ● 自動酶標儀

    [方法]
    1.將200ul濃度為1ug/ml的抗pⅢmAb 57D1①包被緩沖液,分別加在多孔板各個板孔 中。4℃孵育過夜。
    2.棄去包被液,并用PBST洗滌數次。
    3.每孔加250ul封閉液,37℃孵育60分鐘。包被板可立即使用或在一20℃保存數周。
    4.每孔加100ul封閉液和100ul如上述制備的清亮噬菌體上清。在37℃下孵育60分鐘以 使噬菌體顆粒結合。
    5.將人血清在200ul封閉液中,室溫預孵育30分鐘;其中包含2.5ul細菌提取物、大約 5 × 1010pfuPEG—濃縮f1Rl—11.1噬菌體以及10ul來自無關大鼠雜交瘤細胞上清。當 檢測單個克隆時,采用1:100比例稀釋血清; 當檢測噬菌體文庫時,采用1:400比 例稀釋血清。此步可以減少針對野生型噬菌體的血清抗體、細菌污染物及大鼠抗pⅢ單 抗的干擾。
    6.從包被板中棄去噬茵體上清,并用PBST充分洗滌板孔。
    7.在每孔中加200ul預孵育的血清混合物,在室溫下孵育2小時。
    8.除去血清混合物,用PBST充分洗滌板孔。在每孔中加入200ul堿性磷酸酶標記二抗, 室溫孵育60分鐘。
    9.除去二抗溶液,并用PBST充分洗滌。用底物緩沖液快速洗滌板孔。
    10.在每孔中加200ul顯色液,37℃暗處孵育15—60分鐘。
    11.用自動酶標儀將A405和A655間的差值作為結果記錄。
     

產品中心 Products
在線客服 聯系方式

服務熱線

021-54479081
021-54461587

久久久久久国产视频 | 国产精品va在线观看无码 | 国产成人在线免费视频 | 精品欧美一区视频在线观看 | 国产乱子轮xxx农村 国产顶级熟妇高潮xxxxx | 亚洲中文字幕无码爆乳av | 少妇av射精精品蜜桃专区 | 国产免费一区二区三区免费视频 | 中文字幕无码精品亚洲资源网久久 | 国产精品99久久免费黑人人妻 | 无人区一码二码三码四码区 | 天天躁日日躁狠狠躁av | 久久久久女人精品毛片 | 亚洲精品成人网站在线观看 | 国产乱理伦片a级在线观看 国产乱理论片在线观看理论 | 亚洲av无码国产精品色午夜字幕 | 亚洲av不卡无码国产 | 欧美mv日韩mv国产网站 | 99久久精品毛片免费播放 | 国产精品一区二区久久不卡 | 久久亚洲av午夜福利精品一区 | 亚洲av无码一区二区三区dv | 毛片在线观看地址 | 久久久久国产一区二区 | 久久精品女人天堂av免费观看 | 精品久久久久久久久久久国产字幕 | 伊人久久精品一区二区三区 | 国产成人无码免费看片软件 | 国内最真实的xxxx人伦 | 国产成人午夜高潮毛片 | 久久久久久久综合色一本 | 一本加勒比hezyo无码人妻 | 国产一区免费视频 | 日韩精品无码一区二区 | 毛片视频免费网站 | 国产喷水在线观看 | 91摄影师与白嫩模特观看 | 黄色录像大片毛片aa | 亚洲熟少妇在线播放999 | 大地资源在线观看官网第三页 | 99福利资源久久福利资源 |