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    大鼠胰島素細胞傳代的方法

    發(fā)布時間: 2021-12-09  點擊次數(shù): 2124次

    大鼠胰島素細胞傳代方法:我們在收到細胞后,取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況。


    如果細胞已長滿,即可進行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:

    1. 棄去培養(yǎng)液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。

    2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱,然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓分散,輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶,細胞隨即脫落下來。

    3. 加入6-8ml*培養(yǎng)基,吸出,分到新的培養(yǎng)瓶中。1:3~1:6傳代;2~3天1次。 

    細胞

    如果細胞未長滿,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi),嚴(yán)格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶,吸出培養(yǎng)液,僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。


    細胞來源于美國ScienCell實驗室、美國ATCC細胞庫,所有細胞均為原代細胞,非細胞系。細胞經(jīng)過嚴(yán)格的控制(從組織來源、實驗室條件等方面),純度可達98%。不同的細胞傳代次數(shù)不一。多數(shù)細胞種類是從胚胎提取,于原代(或二代)凍存在液氮中。大鼠胰島素細胞采用干冰運輸,客戶收到細胞后,從干冰中取出放入液氮中保存,待實驗安排好后,解凍后即可以進行復(fù)蘇培養(yǎng)。美國ATCC細胞庫、ScienCell實驗室的細胞、培養(yǎng)基都是經(jīng)過嚴(yán)格檢驗,分離、配制而成,產(chǎn)品質(zhì)量過硬。

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